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解析分光光度计仪器组成原理操作方法
点击次数:1050      更新时间:2022-01-05

解析分光光度计仪器组成原理操作方法

 

 

 

仪器组成

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓

原理

分光光度计采用个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:

A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc

式中 :A 为吸光度;

I0为入射的单色光强度;

I 为透射的单色光强度;

T 为物质的透射率;

k 为摩尔吸收系数;

L 为被分析物质的光程,即比色皿的边长;

c 为物质的浓度;

 

操作方法

1.接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟。

2.将灵敏度开关调至“1"档(若零点调节器调不到“0"时,需选用较。)

3.根据所需波长转动波长选择钮。

4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。

5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器,使读数盘针向t=0处。

6.盖上暗箱盖,调节“100"调节器,使空白管的t=100,针稳定后逐步拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。

7.比色毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净